2019 9/8 インストール追記 2013年のペーパーより ハイスループットシーケンシング（HTS）は、シーケンシングデータの急速な成長率をもたらした。 著者らのラボでは、毎日テラバイトのデータを生成している。 これは通常、バリアントコーラー、定量およびア…

2018 10/26 追記, 説明追加 2019 パラメータ追記, パラメータ修正, パラメータ追記, condaインストール追記, 0.14.1のhelpに更新, コメント追記, コマンド追記 2020 1/17 追記, help更新, multiqcと連携する例を追記 2023/01/11 other adapter sequences追記…

次世代シークエンシング（NGS）プラットフォームでよく知られているシングルエンドシーケンシング技術からmodifyされたペアエンドシーケンシング技術は、ゲノミクスにおいてますます重要な役割を果たしている。 DNA（またはcDNA）断片の2つの鎖の5 '末端を配…

Fossil material 由来などのごく短いDNA断片のハイスループットシーケンスでは、ライブラリーの調製中にインサートにライゲーションされたアダプター配列をシークエンシングする可能性がある[論文より ref.1]。このような汚染はよく知られた問題であり、下流…

2022/02/08 インストール追記 次世代シークエンシング技術は、より安価になり、ルーティンの分析に役立っている。アセンブリの前に未処理のリードから特定のシーケンスを抽出または削除することを必要とする多くのタスクがある。抽出された領域特異的なリー…

#2022/04/20 追記 FiltlongはONTのロングリードのクオリティ分析やクオリティ、リード長のトリミングが行えるツール。ウルトラロングリードを低クオリティ領域でカットして、分割出力する機能も備える。2018年4月現在Githubで公開されている。 インストール …

fqtrimは、アダプター、polyA tail、未知塩基（Ns）および低クオリティな3 '領域をトリミングできる多目的トリミングツール。アダプターとポリA配列の不正確なマッチングにも対応している。 このユーティリティは、複雑さの低い配列（ダスト）のフィルターを…

信頼性の低いヌクレオチドがあると、後の分析において偽陰性および偽陽性の数を増加させるか、またはデノボアセンブリにおいて誤ったk-merを生成し、アセンブリを複雑にして誤ったアセンブルを引き起こす可能性がある[論文より ref.4]。信頼性の低いヌクレオ…

sabreはバーコードをdemulitiplexするツール。バーコードを除いたあと、バーコードに従って分割する。バーコードがないリードは別ファイルにまとめて出力される。gzip入力もサポートしている。 インストール Github https://github.com/najoshi/sabre git cl…

古いDNAが断片化したサンプルからのシーケンスが増えている。しばしば数万年前のサンプルからも抽出される古代のサンプルのDNAは断片化が起きており、うまくDNAを抽出してもサイズが100-bpを超えることは滅多にない。短いDNAをペアードエンドでシーケンスす…

化石のようなサンプル（リンク）や昔の人の骨、歯から断片化したDNAを抽出してシーケンスシーケンスすることが増えており、それに伴ってアダプターに5'と3'両側が汚染されたシーケンスデータが増えてきている。AdapterRemoval は柔軟なパラメータセットを持…

2021/10/21, 24 インストール追記 FLEXBARはMultiplexで読んだシーケンスのdemultiplexやアダプタートリミングに使われるツール。柔軟な条件でランできる。よく使われているらしく、現在Flexbar3まで発表されている。解析時間は短く、100Mのリードなら数秒〜…

2019 1/16 誤字修正および対応ツール情報更新、12/29 ツイート追加 2020 1/17 condaインストール追記、4/19 説明追記、5/25 ツイート追記 2023/12/20ツイート追記 今まで様々なNGSの評価ツールが発表されてきたが、それらは特定のデータを評価するものであり…

index (バーコード配列) を設計する際は、判別可能かつ無駄のない適切な長さ、増幅バイアスが起きないようなGC含量、実験データとの干渉がないなどを考える必要がある。それに加えて、index配列に塩基置換、indelなどのシーケンスエラーが起きる可能性がある…

QTrimは454のトリミングツール。PRINSEQと同等のパフォーマンスを持つとされる。 公式HP http://hiv.sanbi.ac.za/software/qtrim#Installation webサーバー http://hiv.sanbi.ac.za/tools/#/qtrim インストール 公式HPから実行可能なバイナリと454のテストデ…

シーケンスされる長さより短いライブラリサイズのシーケンスを行うと、3'側にアダプタやバーコードが出現する。このような汚染配列があると、後の解析に悪影響を与える可能性があるため、クオリティチェックの時に除くのが望ましい。AlienTrimmerはユーザが…

Skewerは並列化に対応したアダプタートリミングツール。ミスマッチの閾値を設定し、それ以上の配列を全てトリミングするように設計されている。シングルエンド、ペアードエンド、ロングインサートのメイトペアのシーケンスリードを扱うことができる。Demulti…

PEATはアダプターの自動トリミングツール。アダプター配列を入力しなくても、頻出する配列を自動で探し出してトリミングを実行する。並列化にも対応しており、高速なトリミングが可能である。論文中ではChIP-seq、MNase-seq、およびRNA-seqなどのデータを使…

AtroposはCutadaptのフォークとして開発されたNGSのアダプタートリミングツール。並列化に対応しており、高速に動作する。Cutadaptよりセンシティブで（ミスマッチを考慮する）、miRNAやbisulfite-seq用のトリミングモードも備える。エラー率やアダプター配…

2020 4/1 9 インストール手順とhelp追記、タイトル修正 2021 6/11 link修正 2022/07/02 インストール手順修正 バクテリアのメタゲノム解析では、度々ホストゲノムのコンタミリードがシーケンスされてしまうことがある。KneadDataはそのようなホスト由来のリ…

TgaDust2は、アダプター、バーコード、単純リピートなどの不要な情報を見つけて除去するツール。2009年にTagDustが発表され、その後2015年にTagDust2が発表された。 公式サイト TagDust インストール brewで導入できる。 brew install TagDust brewではTagDu…

2019 2/14 コマンド追加 2019 5/19 ヘルプ追加、パラメータ変更 2019 12/30並列処理例追加 2020 10/10 リンク追加 nanofitはナノポアのロングリードのクオリティトリミングができるツールである。 インストール Github https://github.com/wdecoster/nanofil…

AfterQCはfastqのフィルタリング、トリミング、エラー修復、およびクオリティチェックを全て自動で行なってくれるツールである。エラー修復はオーバーラップするペアードエンドリードのクオリティを比較して実行される。2017年に論文が発表された。 インスト…

2020 5/14 help追記 2021 1/23 condaによるインストール追記 マルチプルアライメントを行うとアライメントがほとんどできない領域ができることがあるが、そういった領域は情報として利用するのが難しいため、一般的に除去しても問題にならない。trimAIはラー…

condetriはペアリードを考量してクオリティトリミングが行えるperlのツール。 公式サイト https://code.google.com/archive/p/condetri/ マニュアル ダウンロードしたディレクトリにPDFマニュアルあり。 インストール 本体はperlスクリプトである。 GIthub …

20196/13 タイトル修正 2020 7/24 bbdukコマンド追記 の続き。BBtoolsの残りのコマンドを紹介する。紹介するのは以下のコマンド。 Reformat - フォーマット変換やクオリティトリミング。 Repair - ペアリードの順番が壊れたファイルを修復する。 Stats - ア…

qrqcは qrqcはリードのクオリティや配列の分布をレポートできるRのパッケージ。1000-bp以下のfastqに対応している。同様の目的で使用されるツールとしてfastqcがある。 インストール Rにて ## try http:// if https:// URLs are not supported source("https…

Scytheはfastqのアダプター配列トリミングツール。ライブラリ調整過程でリード長より短い回断片が精製されてくると、3'末端側にアダプター配列のついた配列がシーケンスされる。これは例えばsmall RNAのシーケンスを想定するとわかりやすい。small-RNAのライ…

イルミナはmate pairシーケンスのキットも販売している。このプロトコルではNextraのトランスポゾンでタギングしたゲノムをセルフライゲーションさせて離れた配列を近づける。そのため中央にジャンクション配列が残る（図１ 赤の配列）。NxTrimはそのジャン…

2020 10/31 インストール追記 2020 11/24 help追記 2021 6/15 コマンド追記 sickleはfastqのクオリティトリミングツール。リード長の0.1倍のウィンドウサイズでリードを分析し、指定値以下のクオリティになった領域をトリムする。Trimmomaticと同様、ペアリ…